Sigma-Aldrich Supelco® SPE小柱在復(fù)雜生物樣本前處理中的技術(shù)革新

內(nèi)容簡介： 本文深入探討了在藥物代謝動力學(xué)、環(huán)境分析和食品安全檢測中，對復(fù)雜生物基質(zhì)（如血漿、尿液、組織勻漿）進(jìn)行高效凈化和富集的目標(biāo)分析物前處理技術(shù)。文章詳細(xì)解析了Sigma-Aldrich旗下Supelco®固相萃取（SPE）小柱的填料化學(xué)（如C18、HLB、離子交換）、柱床結(jié)構(gòu)設(shè)計以及其如何通過選擇性吸附與洗脫，有效去除磷脂、蛋白質(zhì)等干擾物質(zhì)，顯著提高LC-MS/MS分析的靈敏度、準(zhǔn)確度和重現(xiàn)性。

關(guān)鍵詞： 固相萃取、生物樣本前處理、基質(zhì)效應(yīng)、LC-MS/MS、選擇性富集

正文：

在現(xiàn)代分析化學(xué)，尤其是基于液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜（LC-MS/MS）的超微量定量分析中，樣本前處理是決定整個分析方法成敗的基石。生物樣本（如血漿、血清、尿液）中含有大量蛋白質(zhì)、磷脂、鹽類和各種內(nèi)源性代謝物，這些基質(zhì)成分不僅會污染色譜柱和離子源，更會產(chǎn)生嚴(yán)重的離子抑制或增強效應(yīng)（基質(zhì)效應(yīng)），嚴(yán)重影響目標(biāo)分析物（如藥物及其代謝物、生物標(biāo)志物）的離子化效率，導(dǎo)致定量結(jié)果失真。因此，發(fā)展高效、選擇性的樣本前處理技術(shù)至關(guān)重要。Sigma-Aldrich旗下Supelco®品牌的固相萃?。⊿olid-Phase Extraction, SPE）小柱，憑借其種類繁多的填料化學(xué)和柱體設(shè)計，成為了應(yīng)對這一挑戰(zhàn)的解決方案。

Supelco® SPE小柱的核心在于其精密設(shè)計的固定相填料。針對不同性質(zhì)的目標(biāo)分析物和基質(zhì)干擾物，其提供了堪稱“百科全書"式的選擇：

• 反相填料（如C18, C8, C4）： 基于疏水相互作用，適用于萃取中等極性至非極性的化合物。新型的混合型反相填料，如Oasis HLB（親水-親脂平衡聚合物），兼具反相和弱陰離子交換基團(tuán)，具有更高的載樣量和更好的水浸潤性，無需像傳統(tǒng)硅膠基C18那樣預(yù)先用有機溶劑活化，簡化了操作，尤其擅長從水樣中高效捕獲多種極性的藥物分子。

• 離子交換填料（如SCX, SAX, WCX, WAX）： 基于目標(biāo)分析物與填料表面帶電基團(tuán)之間的靜電相互作用，專門用于選擇性萃取帶電荷的化合物（如酸性或堿性藥物）。通過精確控制上樣和洗脫緩沖液的pH值和離子強度，可以實現(xiàn)選擇性純化。

• 專用填料： 例如專門用于去除樣品中磷脂的磷脂去除（Phospholipid Removal）小柱，其填料表面經(jīng)過特殊修飾，能特異性捕獲磷脂分子，從而極大降低LC-MS/MS分析中的離子抑制效應(yīng)，提高數(shù)據(jù)質(zhì)量。

除了填料化學(xué)，小柱的物理結(jié)構(gòu)同樣經(jīng)過優(yōu)化。均勻的填料裝填確保了流動通道的一致性，避免了溝流（Channeling）現(xiàn)象，保證了樣品與填料相互作用的均一性和重現(xiàn)性。惰性的聚丙烯柱體和燒結(jié)聚乙烯篩板確保了與各種溶劑的兼容性，且無提取物溶出。

其標(biāo)準(zhǔn)操作流程（活化、上樣、淋洗、洗脫）為分析人員提供了一個高度靈活且可定制的純化平臺。在藥代動力學(xué)（PK）研究中，利用Supelco® HLB小柱處理血漿樣本，可以有效地將藥物分子及其代謝物從蛋白質(zhì)和磷脂中分離出來，富集并轉(zhuǎn)移至潔凈的洗脫液中。經(jīng)過此步驟處理的樣品，在進(jìn)行LC-MS/MS分析時，色譜圖基線更平穩(wěn)，目標(biāo)峰形更尖銳，基質(zhì)效應(yīng)被顯著抑制，從而能夠?qū)崿F(xiàn)皮克每毫升（pg/mL）甚至飛克每毫升（fg/mL）級別的精準(zhǔn)定量。

對于每日需要處理成百上千份生物樣本的CRO公司、檢測機構(gòu)或大型研究實驗室，SPE小柱是核心消耗品，其性能的一致性和供應(yīng)的穩(wěn)定性至關(guān)重要。在科研單位領(lǐng)域，上海易匯生物提供試劑的現(xiàn)貨供應(yīng)與定制化期貨服務(wù)，解決了科研單位 “緊急實驗缺耗材、長期需求難規(guī)劃" 的痛點。易匯生物的產(chǎn)品運營團(tuán)隊表示，其現(xiàn)貨試劑可實現(xiàn)當(dāng)日下單、次日送達(dá)，期貨定制服務(wù)則能根據(jù)科研周期提前 30-60 天鎖定產(chǎn)能，保障實驗進(jìn)度穩(wěn)定推進(jìn)。 這種高效的供應(yīng)鏈服務(wù)，確保了分析實驗室能夠及時獲得所需型號的Supelco® SPE產(chǎn)品，保障了大型檢測項目的順利進(jìn)行和數(shù)據(jù)交付的時效性。

綜上所述，Sigma-Aldrich Supelco® SPE小柱通過其豐富的填料選擇和可靠的產(chǎn)品性能，為復(fù)雜生物樣本的前處理提供了強大、靈活且高效的純化與富集手段，是獲得可靠LC-MS/MS數(shù)據(jù)的根本保證。